DNA pull-down试剂盒（植物）

DNA pull down技术是体外研究DNA与蛋白质互作的有力工具。该技术针对目标区域设计特异性DNA探针并经过脱硫生物素标记，脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合(Wang,Yu et al.2004)。然后，细胞提取物与磁珠-DNA探针孵育，作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合；经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除；最后，经洗脱液洗脱，得到目的DNA探针-蛋白质复合物，再经过Western Blot或质谱(MS) 鉴定蛋白质类型。其原理图如1.1:

Q:通过pull-down后银染验证发现，没有想要的目的条带?

1)有可能是样品被蛋白酶降解，对应的策略是需要添加蛋白酶抑制剂，所有操作保持 4℃以下冰上操作并防止冻融；

2)有可能是加入生物素标记DNA量不足，可以增加生物素标记DNA量；

3)裂解液盐碱度太高，需用低盐碱度的裂解液；

4)加入细胞裂解液不够，可以增加细胞裂解量。

相关产品

⇒ 银染试剂盒(Silver Stain Kit)                 ⇒ Co-IP试剂盒（植物）

⇒ ChIP试剂盒（动物）                            ⇒ ChIP试剂盒（植物）

⇒ RIP试剂盒                                            ⇒ RNA pull-down试剂盒

⇒ DNA pull-down试剂盒（动物）          ⇒ DNA pull-down试剂盒（植物）

相关技术服务

► 双荧光素酶报告系统          ► 酵母双杂交                  ► EMSA                    ► RNA pull-down

► RIP-qPCR                         ► DNA pull-down          ► ChIP-qPCR            ► 酵母单杂交

► CUT&Tag                         ► Co-IP