產品說明
KOD DNA Polymerase是基於超嗜熱原始菌Thermococcus kodakaraensis KOD1的DNA聚合酶,在大腸杆菌中重組表達得到的高度熱穩定的DNA聚合酶,具有較高的擴增效率和保真性。由於其具備超強的3' - 5' 核酸外切酶活性,外切酶活性使其具有比Taq DNA Polymerase更高的保真性,並且還有著高效的擴增效率,可以到達1kb/10s的速度,同時具有很強的長片擴增能力。 KOD DNA Polymerase擴增反應產生平末端產物。
產品特點
具有強力的3→5核酸外切酶活性(校正活性),可準確地對目的片段進行擴增;
KOD酶的保真性是Taq酶的約50倍;
可擴增結構複雜的DNA模板;
產品應用
PCR克隆(平末端克隆),突變修複,測序反應,複雜模板擴增
產品組分
產品參數
操作說明
【注】:a.引物濃度:一般來說反應體係中引物終濃度為0.2uM即可得到較好的效果。反應性能較差時,可在終濃度0.1uM-1.0uM範圍內調整引物濃度。
b.模板濃度:動植物基因組DNA 0.1~1ug,大腸杆菌基因組DNA 10~100 ng,λDNA 0.1~10 ng,質粒DNA 0.1~10 ng。如模板為未稀釋cDNA原液,使用體積不應超過qPCR反應總體積的1/10。
c.聚合酶濃度:酶量可在0.25 - 1uL之間調整。通常情況下加大酶量可以提高擴增產量,但有可能會使特異性下降。
d.Mg2+ 和添加劑:大部分PCR反應體係中的Mg2+濃度應在1.0–5.0 mM範圍之內,但對於一些擴增困難的樣本,例如高GC的DNA樣本,可能需要在PCR反應體係中加入添加劑,例如DMSO或甲酰胺等。
【注】:e.退火溫度和時間:退火溫度需要根據引物的Tm值進行調整,一般設置成低於引物Tm值3 ~ 5℃即可。推薦退火時間設置為20 sec,可以在10-30 sec內調節。